,T4 RNA连接酶

 

英文名称：T4 RNA Ligase 

分子量：43.6kDa，单体

级别：BR

来源：含有T4噬菌体克隆基因63的大肠杆菌

 浓度：10u/ul 

活性定义：是指在37℃、30分钟内将1nmol 5'-[32P]-(A)12-18转化为磷酸酶抗性形式所需的酶量

 酶活性分析混合物：50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 10uM 5'-[32P]-(A)12-18(10uM 5'-末端）

 保存液组分：20mM Tris-HCL(PH7.5), 50mM KC1, 1mM DTT，0.1mM EDTA，0.5mM ELUGENT变性剂和50%(v/v)甘油

10×反应缓冲液：500mM HEPES-NaOH(PH8.0，25℃), 100mM MgCL2, 100mM DTT

抑制剂：金属螯合剂、SH基团修饰试剂

 失活：70℃加热10分钟

 质量控制：测试表明无内切和外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染

 备注：反应体系中ATP的浓度取决于连接反应的类型，推荐的BSA反应浓度是0.1mg/ml

性状(以下信息供参考)：重组酶，催化ATP依赖的分子内和分子间磷酸二酯键连接（5'-磷酸基团和3'-羟基末端），底物分子为多聚核苷酸、寡核苷酸、ssRNA和ss，分子之间的最小的连接底物是核苷3'，5'-二磷酸，而分子内连接的最小底物是8个碱基的寡核苷酸。配套提供反应缓冲液、ATP和BSA溶液。催化3'→5'磷酸二酯键的形成，使核苷酸的5'-磷酸末端和5'-羟基末端连接。作用底物包括单链RNA、及二核苷焦磷酸。随酶提供10X 反应缓冲液

 用途：本品供科研，不得用于其它用途。(以下用途供参考)连接RNA和RNA ；RNA3'-末端标记胞嘧啶3'，5'-双[a-32P]磷酸； tRNA的特异性修饰；合成寡核苷酸的环化；寡聚脱氧核糖核苷酸与单链c连接，用于5'RACE（快速扩增c末端）分析

 保存： -20°C