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【概要】
脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol， DON) 又称呕吐毒素(vomIT(http://www.maoyihang.com/sell/l_25/)oxin)，主要是由镰刀菌的某些种产生的化学(http://www.maoyihang.com/sell/l_9/)结构和生物活性相似的有毒代谢产物——单端孢霉烯族化合物中的一种。广泛存在于全球，主要污染小麦、大麦、玉米等谷类作物，也污染粮食制品，人和动物在误食被该毒素污染的粮谷类后可以产生广泛的毒性效应。DON最明显的毒性作用是引起呕吐、腹泻、腹痛等症状，并延缓生长、降低免疫机能，与贫血、免疫抑制、食管癌、克山病也具有密切联系。给人、家畜的健康造成巨大威胁。
【适用范围及性能】
呕吐毒素免疫亲和柱用于定性、定量检测谷物、酒类等食品(http://www.maoyihang.com/sell/l_32/)和饲料等样本中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇时的样品前处理。
柱容量：≥1200ng
回收(http://www.maoyihang.com/buy/)率：≥80%
【试验原理】
呕吐毒素免疫亲和柱的测定的基础是抗原抗体反应，脱氧雪腐镰刀菌烯醇单克隆抗体连接在柱内凝胶上，样品中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇经过提取、过滤、稀释，然后将样品提取液缓慢的通过脱氧雪腐镰刀菌烯醇免疫亲和层析柱，在免疫亲和柱内，脱氧雪腐镰刀菌烯醇与抗体结合，之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合的其他物质。用甲醇洗脱脱氧雪腐镰刀菌烯醇，然后注入到分析仪器(http://www.maoyihang.com/sell/l_22/)中用于检测。
【包装组成】
根据不同规格，每一个盒中包含5/25支脱氧雪腐镰刀菌烯醇免疫亲和层析柱及1份说明书。
【需要而未提供的设备及试剂】
设备：
1. 高速均质器或组织匀浆机
2. 粉碎机
3. 200mL/50mL量筒
4. 天平：感量0.1g
5. 微量移液器：单道 100μL～1000μL
6. 槽纹滤纸(折叠快速定性或定量滤纸)
7. 玻璃微纤维滤纸(1.5μm孔径)
8. 50mL漏斗
9. 一次性玻璃试管
10. 泵流操作架(包括空气泵，不同容积的玻璃注射器等)
试剂：
1. 蒸馏水或去离子水
2. 聚乙二醇(PEG)8000
3. 色谱级甲醇
4. pH7.0磷酸盐缓冲溶液(PBS)：称取8.0g氯化钠，1.2g磷酸氢二钠，0.2g磷酸二氢钾，0.2g氯化钾，用990mL纯水溶解，然后用浓盐酸调节pH值至7.0，最后用纯水稀释至1000mL
【样本处理步骤】
(一)花生，玉米，大米，小麦及其制品和饲料(稀释倍数4)
1. 称取25g粉碎的样品，加入10g聚乙二醇8000后，用去离子水定容至200mL;
2. 转移至均质杯中，均质器高速均质2min;
3. 4000r/min离心5min或用定量滤纸过滤，取上清液，使用玻璃纤维滤纸过滤后待用;
4. 将免疫亲和柱连接于10.0mL玻璃注射器下。准确移取2mL上述样品提取液注入玻璃注射器;
5. 将空气压力泵与玻璃注射器连接，调节压力使溶液以约1滴/s流速缓慢通过免疫亲和柱，直至2~3mL空气通过柱体;
6. 以5.0mLPBS溶液和去离子水快速淋洗柱子1次，流速为2-3滴/s。弃去全部流出液，并使2mL~3mL空气通过柱体;
7. 准确加入1.0mL色谱级甲醇洗脱，流速为1 滴/s，收集全部洗脱液于玻璃试管中，供检测用。
(二)酒类(稀释倍数0.5)
1. 取脱气酒类试样(含二氧化碳的酒类样品使用前先置于4℃冰箱冷藏30min，过滤或超声脱气)或其他不含二氧化碳的酒类试样20g(精确到0.01g)，加入1g聚乙二醇(4.3)，用水定容至25.0mL，混匀;
2. 用玻璃纤维滤纸过滤至滤液澄清;
3. 将免疫亲和柱连接于10.0mL玻璃注射器下。准确移取2mL上述样品提取液注入玻璃注射器;
4. 将空气压力泵与玻璃注射器连接，调节压力使溶液以约1滴/s流速缓慢通过免疫亲和柱，直至2~3mL空气通过柱体;
5. 以5.0mLPBS溶液和去离子水快速淋洗柱子1次，流速为2-3滴/秒。弃去全部流出液，并使2mL~3mL空气通过柱体;
6. 准确加入1.0mL色谱级甲醇洗脱，流速为1 滴/s，收集全部洗脱液于玻璃试管中，供检测用。
【结果判定】
经呕吐毒素免疫亲和柱净化后，收集到的甲醇洗脱液可直接使用荧光计或者HPLC检测，也可使用薄层色谱或者酶联免疫试剂盒进行检测。也可氮气吹干后，复溶以提升浓度(稀释倍数相应变化)。
【注意事项】
1. 呕吐毒素危害很大，应戴手套操作。
2. 不要使用过了有效日期的免疫亲和柱。
【贮藏条件及保存期】
贮藏条件：呕吐毒素免疫亲和柱可于常温保存，2-8℃储存可延长有效期，不可冻存。
保存期：该产品(http://www.maoyihang.com/invest/)有效期为12个月。
